Práctica 24: Recuento de plaquetas con hemocitómetro. (PXXXV) (B2)

Fecha: 12-1-15

Recuento de plaquetas con hemocitómetro.

Introducción:

En esta práctica podremos obtener un recuento de plaquetas en un determinado volumen de sangre y asi, comprobar si existe alguna patología.

Material:

-Un microscopio.

-Una pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.

-Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta diluidora.

-Una camara de recuento, con un retículo tipo Neubauer.

-Un cubre.

-Papel para limpiar posibles desechos.

-Una prepipeta o una micropipeta.

-Una placa de petri.

-Papel de filtro.

-Tubo de ensayo.

Muestra:

-Sangre capilar o venosa anticoagulada fresca.

Reactivos:

-Líquido de dilución suministrado por los laboratorios Spinreact.

-Agua destilada.

Fundamento:

-Para el recuento en cámara de plaquetas, se diluye la sangre problema en un líquido apropiado y, posteriormente, se deposita en la cámara de recuento, donde se cuentan las células presentes en alguno de los cuadros de uno de los retículos.

Procedimiento:

1. Sellar un cubre  sobre el retículo de la cámara humedeciendo las bandas laterales de la cámara de recuento.

2. Con la pipeta diluidora, absorber sangre hasta 1.

3. Limpiar con cuidado la punta de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de la sangre.

4. Seguidamente aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.

5. Quitar el tubo de goma y homogenizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante cinco minutos.

6. Desechar las 5 primeras gotas y depositar la 6 entre la cámara y el cubre.

7. Depositar la cámara de recuento en el interior de una placa de petri humeda(se consigue con  un papel de filtro bañado en agua).

8.Dejar actuar 15 minutos.

9. Enfocar con el objetivo de 10x  para ayudarnos a localizar los cuadrados, y seguidamente con el de 40x.

10. Contar las plaquetas presentes en el cuadro grande central(16 cuadros pequeños):

Interpretación de los resultados:

En total el recuento de plaquetas es: 13+10+12+12+20+13+11+16+4+6+8+3+14+8+11+11=172 plaquetas

Para calcular la media se realiza mediante la siguiente fórmula:

PLT/mm3=PxVxDx1000; PLT/mm3= 172 x 10 x 100 x 1000= 172000000 plaquetas/mm3

P=Nº de plaquetas contadas en un cuadro grande.

V=Corrección de volumen(10)

D=Corrección de dilución(100)

Práctica 23: Recuento de leucocitos (WBC)(PXXVII)(B2)

Fecha: 12-1-15

Recuento de leucocitos (WBC)

Introducción:

El recuento de leucocitos consiste en la determinación del º de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre.

Material:

-Un microscopio.

-Una pipeta diluidora de Thoma, para recuento de leucocitos.

-Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta diluidora.

-Una camara de recuento, con un retículo tipo Neubauer.

-Un cubre.

-Papel para limpiar posibles desechos.

-Una prepipeta o una micropipeta.

Muestra:

-Sangre capilar o venosa anticoagulada fresca.

Reactivos:

-Líquido de dilución Turck, especial para la lisis de los hematíes.

-Agua destilada.

Fundamento:

-En esta práctica podremos obtener un nº determinado de leucocitos en un volumen de sangre ya prefijado, para detectar patologías como leucopenias y/o leucocitosis. Los valores normales oscilan entre 5.000 y 11.000 leucocitos/mm3 de sangre.

Procedimiento:

1. Sellar un cubre  sobre el retículo de la cámara humedeciendo las bandas laterales de la cámara de recuento.

2. Con la pipeta diluidora, absorber sangre hasta 1.

3. Limpiar con cuidado la punta de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de la sangre.

4. Seguidamente aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.

5. Quitar el tubo de goma y homogenizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante cinco minutos.

6. Desechar las tres primeras gotas y depositar la cuarta  entre la cámara y el cubre.

7. Enfocar con el objetivo de 10x  para ayudarnos a localizar los cuadrados, y seguidamente con el de 40x.

8. Contar los leucocitos presentes en 4 cuadros grandes (80 cuadros pequeños):

Interpretación de los resultados:

En total son 455 glóbulos bláncos.

Para el cálculo de la media de leucocitos se realiza mediante la siguiente fórmula:

WBC=L/4x10xD; WBC= 455/4x10x 10= 11375 leucocitos/mm3

L=Nº de leucocitos.

D=Factor de dilución.

Práctica 22: Recuento de plaquetas en frotis sanguíneos. (PXXXIV) (B1)

Fecha: 9-1-15

Recuento de plaquetas en frotis sanguíneo.

Introducción 

El recuento de plaquetas consiste en la determinación del nº de trombocitos presentes en un volumen determinado de sangre.

Se puede realizar de forma aproximada contando los trombocitos presentes en varios campos microscópicos.

Material:

-Un microscopio.

-Papel y boligrafo.

-Un capilar heparizado.

-Una lanceta.

-Gasas.

-Dos portaobjetos.

Reactivos:

-Tinción de panóptico rápido.

-Agua destilada.

-Alcohol.

-Aceite de inmersión.

Muestra:

-Sangre capilar o venosa anticoagulada.

Fundamento:

Con esta práctica podremos observar la morfología de las plaquetas y si se presenta alguna patología derivada de los trombocitos.

Procedimiento:

1. Realizar una extensión sanguínea con la ayuda de unc apilar y un portaobjetos.

2. Teñir la muestra con panóptico rápido.

3. Observar a microscopio con el objetivo de inmersión.

4. Apuntar cuantas plaquetas se observan en X campos microscópicos.

Lectura de los resultados:

Se han observado diez campos microscópicos, y en cada campo había:

·Campo 1: 7 plaquetas.

·Campo 2: 6 plaquetas.

·Campo 3: 9 plaquetas.

·Campo 4: 7 plaquetas.

·Campo 5: 6 plaquetas.

·Campo 6: 5 plaquetas.

·Campo 7: 8 plaquetas.

·Campo 8: 5 plaquetas.

·Campo 9: 5 plaquetas.

·Campo 10: 2 plaquetas.

Para cuantificar, de forma aproximada, el nº de trombocitos comprendidos en 1mm3 de sangre se aplica la siguiente fórmula:

PLT/mm3(nº de plaquetas por mm3 de sangre)=PLT/Cx20000(Medida del nº de plaquetas contadas en varios campos microscópicos, en este caso, en 10)

PLT/mm3= (60/10)x20000=120000PLT/mm3

Lo normal esta entre 130000 y 400000.

En este caso se trata de una plaquetopenia.