Práctica 36: Determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada(TTPA)(PXXXIX)(B3)

Fecha: 4-3-15

Determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada.(TTPA)

Introducción:

El TTPA es el tiempo que tarda en coagular un plasma pobre en plaquetas PPP, tras su recalcificación y en presencia de un sustituto de f3p.

Material:

-Una gradilla.

-Un coagulómetro.

-Dos trocitos de acero para introducirlos en las cubetas de coagulómetro.

-Una micropipeta de 100microlitros.

-Un rotulador de vidrio.

-Un baño de agua ajustable a 37ºC.

-Tubos de ensayo de plástico.

Reactivos:

-Solución de cloruro cálcico 0,025%.

-Una cefalina activada con ácido elágico.

-Un pool de plasmas normales simulando un plasma control.

Muestra:

-Un plasma pobre en plaquetas (PPP).

Fundamento:

-El sustituto del f3p consiste en una suspensión de fosfolípidos, obtenida a partir de cerebros de conejos, que recibe el nombre de cefalina.

Procedimiento:

1. Rotular un tubo con la letra C de control y otro con la letra M de muestra.

2. Atemperar estos dos tubos a 37ºC, puede hacerse en el coagulómetro, y los reactivos en la mano.

3. Añadir al tubo C 100microlitros de plasma control y 100microlitros de muestra a tubo M.

4. Añadir 100microlitros a cada uno de los tubos, la cefalina activada (R1).

5. Una vez en el coagulómetro añadir 100 microlitros de cloruro cálcico (R2) a cada tubo, realizandolo uno detrás de otro.

Lectura de los resultados:

TTPA de la muestra: 116,6 segundos

TTPA del control: 28,1 segundos.

Diferencia entre TTPA de la muestra y TTPA del control: 8,1%

Cociente entre el TTPA de la muestra y TTPA del control: 4,14
Los valores normales oscilan entre 30 y 40 segundos.