Determinación del tiempo de protrombina (TP).
Introducción:
El tiempo de protrombina (TP), también se conoce como tiempo de Quick, es el tiempo que tarda en coagular un PPP, cuando se pone en contacto con un exceso de calcio y de tromboplastina hística.
Material:
-Una gradilla.
-Un coagulómetro.
-Un trocito de acero para depositarlo en el interior de la cubeta del espectrofotómetro.
-Un rotulador de vidrio.
-Una micropipeta de 100 microlitros y otra de 200 o regulable.
-Un baño de agua ajustable a 37ºC.
-Dos tubos de ensayo de plástico.
Reactivos:
-Una tromboplastina cálcica.
Muestra:
-Un plasma pobre en plaquetas (PPP).
Fundamento:
-El reactivo utilizado para la realización de esta prueba es una mezcla de tromboplastina hística (TH) y de calcio, por lo que recibe el nombre de tromboplastina cálcica.
La TH procede de extractos de cerebro o de pulmón, de hombre o de animales(Generalmente, de conejo o de vaca).
Procedimiento:
1. Diluir la tromboplastina cálcica, sin agitarla bruscamente, en el bote pone lo que se le debe añadir.
2. Atemperar la tromboplastina a 37ºC en la mano y luedo en el coagulómetro o bien en el baño maría.
3. Introducir el trocito de acero en una cubeta de coagulómetro.
4. Rotular el extremo superior de la cubeta de coagulómetro con la letra M, de muestra.
5. Verter 100microlitro del PPP problema en el interior de la cubeta e incubar a 37ºC.
6. Una vez este la cubeta en el coagulómetro introducir 200microlitros de tromboplastina cálcica y anotar los resultados.
Lectura de los resultados:
TP(tiempo en aparecer el coágulo)= 5,1 segundos, Rat:0,18.
Los valores normales oscilan entre 11 y 15 segundos.
Los resultados se pueden expresar en porcentaje calculando el índice de Quirck, para ello se prepara una batería de disoluciones, explicadas en la práctica 39: Preparación de una curva de actividad de la protrombina. (PXL)(B3). Los valores normales de este índice oscilan entre el 70 y el 100%.
También se pueden expresar en forma de proporción (ratio) entre el valor, en segundos, del TP del plasma problema y el de un plasma control normal no diluido. Se debe calcular el cociente corregido con el ISI (ídice de sensibilidad internacional), para evitar el error que implica el uso de diferentes TH.
Este cociente se calcula con el INR (International Normalized Ratio):
IRN=(TP del paciente/TP control normal)ISI(elevado a ISI).
Los resultados se pueden expresar en porcentaje calculando el índice de Quirck, para ello se prepara una batería de disoluciones, explicadas en la práctica 39: Preparación de una curva de actividad de la protrombina. (PXL)(B3). Los valores normales de este índice oscilan entre el 70 y el 100%.
También se pueden expresar en forma de proporción (ratio) entre el valor, en segundos, del TP del plasma problema y el de un plasma control normal no diluido. Se debe calcular el cociente corregido con el ISI (ídice de sensibilidad internacional), para evitar el error que implica el uso de diferentes TH.
Este cociente se calcula con el INR (International Normalized Ratio):
IRN=(TP del paciente/TP control normal)ISI(elevado a ISI).
Los valores normales del IRN oscilan entre 0,9 y 1,15.
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