Determinación del índice de lobularidad (IL).
Introducción:
En esta práctica realizaremos un recuento de Arneth, consiste en contar el nº de lobulaciones que tiene una cantidad determinada de neutrófilos (leucocitos) y seguidamente, calcular el nº de lóbulos que hay por cada neutrófilo.
Existen 5 tipos de neutrófilos:
·Tipo I: Neutrófilos con un núcleo no segmentado, es decir, sin lobulaciones.
·Tipo II: Neutrófilos con un núcleo dividido una vez, es decir, con 2 lóbulos.
·Tipo III: Neutrófilos con un núcleo dividido 2 veces, es decir, con 3 lóbulos.
·Tipo IV: Neutrófilos con un núcleo dividido 3 veces, es decir, 4 lóbulos.
·Tipo V: Neutrófilos con un núcleo dividido 4 veces, es decir, 5 lóbulos.
Material:
-Un microscopio.
-Un bolígrafo y un papel.
-Dos portaobjetos.
-Capilar heparizado.
-Gasas.
Reactivos:
-Solución nº2: solución tamponada de xanteno.
-Solución nº3: Solución tamponada de tiazina.
-Alcohol.
-Agua destilada.
-Líquido de inmersión.
Muestra:
-Sangre capilar o venosa fresca anticoagulada.
Fundamento:
En esta práctica lo que haremos, será, determinar una neutrofilia, una neutropenia o una anémia megaloblástica, contado las lobulaciones de una cantidad de neutrófilos determinada.
Procedimiento:
1. Nos pinchamos en un dedo, preferentemente el cuarto dedo,desinfectando la zona con alcohol; realizando una pequeña presión y desechando la primera gota, con un capilar absorber la mayor sangre que se pueda.
2. Con la sangre del capilar, realizamos un frotis sanguíneo en un portaobjetos.
3. Teñir la muestra la la tinción panóptico rápido, dejar secar la muestra y eliminar el exceso con agua destilada.
4.Observar la muestra a microscopio con el objetivo de inmersión.
5.Establecer un orden de seguimiento de la extensión para no contar neutrófilos ya contados, y contar los neutrófilos.
6. Apuntar en un papel en número de lobulaciones observadas y clasificar los diferentes tipos de neutrófilos encontrados.
Lectura de los resultados:
En este caso, hemos teñido la muestra para observar mejor los neutrófilos, y hemos identificado:
·Tipo I: 5 neutrófilos.
·Tipo II: 17 neutrófilos.
· Tipo III: 5 neutrófilos.
· Tipo IV: 3 neutrófilos.
· Tipo V: 0 neutrófilos.
En total son 30 neutrófilos y (5x1+2x17+5x3+4x3+5x0=66) 66 lobulaciones, con estos resultados calculamos el IL: NL( nº de lóbulos contados)/ NN( nº de neutrófilos observados)
IL:66/30= 2.2
Se trata de un resultado normal,, el IL normal esta entre 1.9 y 3, si hay menos de 1.9 se habla de una desviación hacía la izquierda y sie s mayor de 3 se habla de una desviación hacía la derecha.
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