Recuento de plaquetas con hemocitómetro.
Introducción:
En esta práctica podremos obtener un recuento de plaquetas en un determinado volumen de sangre y asi, comprobar si existe alguna patología.
Material:
-Un microscopio.
-Una pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.
-Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta diluidora.
-Una camara de recuento, con un retículo tipo Neubauer.
-Un cubre.
-Papel para limpiar posibles desechos.
-Una prepipeta o una micropipeta.
-Una placa de petri.
-Papel de filtro.
-Tubo de ensayo.
Muestra:
-Sangre capilar o venosa anticoagulada fresca.
Reactivos:
-Líquido de dilución suministrado por los laboratorios Spinreact.
-Agua destilada.
Fundamento:
-Para el recuento en cámara de plaquetas, se diluye la sangre problema en un líquido apropiado y, posteriormente, se deposita en la cámara de recuento, donde se cuentan las células presentes en alguno de los cuadros de uno de los retículos.
Procedimiento:
1. Sellar un cubre sobre el retículo de la cámara humedeciendo las bandas laterales de la cámara de recuento.
2. Con la pipeta diluidora, absorber sangre hasta 1.
3. Limpiar con cuidado la punta de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de la sangre.
4. Seguidamente aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.
5. Quitar el tubo de goma y homogenizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante cinco minutos.
6. Desechar las 5 primeras gotas y depositar la 6 entre la cámara y el cubre.
2. Con la pipeta diluidora, absorber sangre hasta 1.
3. Limpiar con cuidado la punta de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de la sangre.
4. Seguidamente aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.
5. Quitar el tubo de goma y homogenizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante cinco minutos.
6. Desechar las 5 primeras gotas y depositar la 6 entre la cámara y el cubre.
7. Depositar la cámara de recuento en el interior de una placa de petri humeda(se consigue con un papel de filtro bañado en agua).
8.Dejar actuar 15 minutos.
9. Enfocar con el objetivo de 10x para ayudarnos a localizar los cuadrados, y seguidamente con el de 40x.
10. Contar las plaquetas presentes en el cuadro grande central(16 cuadros pequeños):
Interpretación de los resultados:
En total el recuento de plaquetas es: 13+10+12+12+20+13+11+16+4+6+8+3+14+8+11+11=172 plaquetas
Para calcular la media se realiza mediante la siguiente fórmula:
PLT/mm3=PxVxDx1000; PLT/mm3= 172 x 10 x 100 x 1000= 172000000 plaquetas/mm3
P=Nº de plaquetas contadas en un cuadro grande.
V=Corrección de volumen(10)
D=Corrección de dilución(100)
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