Práctica 25: Detección de crioglobulinas (PXXXIII) (B1)

Fecha: 15-1-15

Detección de crioglobulinas.

Introducción:

-Las crioglobulinas son complejos inmunes que están alterados, loq ue hace que se vuelvan insolubles y precipiten en el suero cuando están expuestas a una temperatura inferior a la normal del cuerpo humano. Se distinguen tres tipos de crioglobulinas.

Material:

- Una pipeta pasteur.

- Un tubo de ensayo.

- Una gradilla.

- Una nevera.

- Un baño de agua.

- Un capilar de microhematocrito no heparizado.

- Plastilina.

- Una centrífuga de microhematocrito.

- Una regla o un lector de hematocrito.

Muestra:

-Suero transparente, obtenido de sangre coagulada completamente a temperatura corporal y separado del coágulo en un ambiente cálido.

Fundamento:

-En esta práctica podremos observar si existe alguna crioglobulemia.

Procedimiento:

1. Depositar el suero problema en un tubo de ensayo.

2. Colocar el tubo en una nevera, de forma que esté a una temperatura entre 4 y 6ºC.

3. Examinar el tubo a los 30 minutos y después cada día, durante 6 días.

4. Si aparecen partículas blanquecinas en el suero, este ha de ser incubado a 37ºC en el baño maría.

5. Cuando no desaparecen las partículas, tras la incubación, se considra que estas se deben a restos de fibrina, pero cuando las partículas desaparecen, se estima que son crioglobulinas precipitadas (prueba positiva).

6. El grado de positividad de la prueba puede ser establecido de la siguiente manera:

En el caso de que la prueba  sea positiva, puede realizarse una semicuantificación de las criglobulinas presentes en el suero, mediante la determinación del criocrito.

7. Llenar uncapilar de microhematocrito con el suero, hasta las 3/4 partes de su longitud.

8. Sellar con plastilina el extremo por donde ha entrado el suero.

9.  Enfriar el tubo a 4-6ºC, hasta que s eproduzca la precipitación máxima de las criglobulinas.

10. Centrifugar el tubo a unas 12000g durante 5 minutos.

11. Calcular el porcentaje que supone la columna de precipitado, con respecto a la columna total de suero.

Interpretación de los resultados:

-El criocito es la relación existente entre el volumen ocupado por el precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total, expresada en forma de porcentaje. 

-En clase no se ha podido apreciar crioglobulinas.